Компания CAMAG предлагает Автосамплер CAMAG DBS-MS 500 HCT для клинико-диагностических лабораторий в качестве высокопроизводительной системы с использованием технологии «сухих пятен крови» при проведении серологической диагностики у пациентов на антитела к SARS-CoV-2.
Пандемия коронавируса 2 (SARS-CoV-2) достигла исключительных масштабов. Поэтому по всему миру ученые исследуют процесс выработки иммунитета после заражения, оценивают модели передачи инфекции, создают и исследуют новые вакцины и методы лечения. Формирование и последующее снижение уровня антител IgG и IgM человека к SARS-CoV-2 играет решающую роль в эпидемиологических исследованиях. Несколько исследовательских групп продемонстрировали, что отбор крови на карточки «сухих пятен крови» (DBS) является простым и дешевым способом проведения такого серологического тестирования.
Область применения
Автосамплер CAMAG DBS-MS 500 HCT с модулем CTC PAL позволяет собирать экстракты с DBS карточек во флаконы для образцов или плашки (например, 96-луночные плашки) для дальнейшей обработки (например, ИФА на IgG). Это высокопроизводительная система для диагностических лабораторий для тестирования больших популяций на наличие антител к SARS-CoV-2 с использованием простого и надежного рабочего процесса.
Возможность проведения отбора проб самим клиентом и отправки их в централизованную лабораторию удобна и защищает людей от риска заражения или распространения инфекции.
Имеющиеся в продаже расходные материалы, необходимые для отбора проб на DBS карточки, минимальны:
- Спиртовой тампон для дезинфекции.
- Карточка DBS.
- Скарификатор.
- Инструкции.
Кроме того, такой отбор позволяет использовать отправку образцов обычными почтовыми службами для доставки в лабораторию без необходимости охлаждения проб.
Рекомендуемое оборудование
- Автосамплер CAMAG DBS-MS 500 HCT.
- Робот CTC PAL для сбора фракций в виалы или плашки (например, в 96-луночные плашки).
- Набор ИФА (например, KT-1032 от Epitope Diagnostics).
- Ридер для микроплашек (например, Tecan Sunrise).
- Многоканальная пипетка.
Дополнительно:
- Сменный набор экстракционной головки Ø 6 мм.
- Вошер (например,Thermo Scientific Wellwash) или рабочая станция совместимая с KT-1032 от Epitope Diagnostics.
Пробы
Пробы «сухих пятен крови» с минимальным объемом 10 мкл (Ø ≥6мм) на карточках DBS AutoCollect (85 x 53 мм). Точный отбор по объему крови не требуется. Объем пробы может быть скомпенсирован с помощью сканера гематокрита, встроенного в CAMAG DBS-MS 500 HCT.
Стандарты
Для определения пороговых величин необходимы отрицательные и положительные контрольные образцы.
Экстракция проб
Чтобы начать работу, DBS карточки загружаются в DBS-MS 500HCT, в программе вводят наименования всех проб в очереди. После этого запускается цикл и каждая DBS карточка сначала детектируется с помощью камеры в соответствии с критериями качества «пятна» и штрих-кодом или этикеткой.
В следующем модуле определяется гематокрит для компенсации распределения пятна перед экстракцией, и затем проводится экстракция (прямое элюирование из центра пятна Ø 4 мм) непосредственно в 96-луночную плашку.
Для получения концентрированного экстракта, который может быть использован в дальнейшем без дополнительных операций, необходимо всего 100 мкл буферного раствора из набора Epitope ELISA и 2-3 минуты/пробу в зависимости от длительности программы промывки.
Результаты
В ходе пилотного исследования было проанализировано 13 аутентичных образцов и проведено сравнение с серологическим экспресс-тестированием. Из них 12 (92,3%) были идентифицированы правильно с использованием описанного здесь DBS метода. Один образец был определен как ложноотрицательный. Поскольку иммунный ответ является зависимой от времени реакцией, продолжительность 12 дней с момента появления симптомов, скорее всего, была недостаточной для формирования устойчивого количества IgG-антител на основе примененного порога сигнала. В целом, тестовая конфигурация показала специфичность 100% (6/6) и чувствительность 86% (6/7).
Стабильность при хранении оценивали сравнением после хранения IgG позитивной пробы жидкой крови в течение 4 недель при температуре 4°C в пробирке для сбора крови EDTA и на DBS карточке, которая помещалась в пластиковый пакет mini grip вместе с осушителем. Обе пробы дали положительный результат на IgG-антитела после длительного хранения, с отклонением сигнала <15% по сравнению с исходным образцом.
Добавить комментарий